脐血造血细胞分离及冻存有新技术
深圳市宝安区中心血站在中国军事医学科学院奚永志教授指导下, 开展的研究涉及脐血造血细胞的分离、冻存、HLA分型、造血活性及 病原微生物检测等诸多方面。其中,朱美玲硕士等主要研究人员采用 优化的羟乙基淀粉法(HES)分离脐血造血细胞,使脐血中的有核细 胞总数(TNC)、单个核细胞数(MNC)及CD34+造血细胞数三项指标 的获得率分别达到88.9%、89.7%、88.5%。与目前国外脐血库常用 的3种方法相比,这种新的分离方法在分离效果上具有操作简便,不 易引起外源性细菌污染等明显的优越性。
脐血细胞低温冻存保护始终是个难题。朱美玲等人优选出深低温 冻存联合保护剂,并对保护剂的加入、促使细胞复苏、复苏后洗涤等 条件进行优化,结果显示,造血细胞、造血祖细胞、集落形成细胞的 复苏率分别达到77.75%、78.5%、87.25%,复苏率高于国际已有报 道水平。在脐血细胞HLA分型研究方面,研究者采用国际上先进的骨 髓及脐血库通用的SSP基因分型方法,建立了新的HLA-A、B、C、D等 位点分型技术,用这种技术对采集的120份脐血进行分型并与血清学 分型方法对比,发现漏检率明显降低。
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